1.1Magneti-G 商標
Magneti-G 商標來自于磁性(Magnetic)的英文諧音,G 為高聚物的漢語拼音的首字母,因此帶有這一商標的產品,均為高聚物材質的磁性微球。這 一 商 標 主 要 用 于 一 系 列 基 于 抗 體 親 和 方 法 的 標 簽 蛋 白 IP 試 劑 盒,目 前 已 有 Anti-His-tag、Anti-Myc-tag、Anti-HA-tag、Anti-DYKDDDDK-tag、Anti-GFP-tag 和 Anti-RFP-tag 六種標簽 IP 試劑盒。后續(xù)將根據客戶的需求,基于 Magneti-G 高聚物磁珠開發(fā)更多相關產品。
1.2 DYKDDDDK 標簽
DYKDDDDK肽段是融合蛋白表達純化過程中最常用的標簽(tag)之一。它可以連接在融合蛋白的 N 端、C 端或序列中間,具有極好的親水性,更容易展示在融合蛋白的表面,干擾融合蛋白功能的可能性較小。這一標簽還具有一個優(yōu)勢:連接在目的蛋白的N 端時,可以被Enterokinase (EK protease)從序列 C 端賴氨酸的位置切除,而不留下冗余殘基。
1.3 Anti-DYKDDDDK 抗體
DYKDDDDK 肽段也經常被稱為 Flag 肽段 , 是 Sigma 公司的注冊商標。大約四十年前,該公司最早篩選了一系列抗 DYKDDDDK 標簽的抗體,分別命名為 Anti-Flag M1,Anti-Flag M2, Anti-Flag M5 等,其中 M2 抗體廣泛用于免疫雜交、免疫沉淀、親和純化等方向。本公司目前有兩株Anti-DYKDDDDK 抗體,親和力都要高于 Anti-Flag M2 抗體,更適合做 WB、IP 等蛋白互作實驗。抗體帶有 biotin 修飾的人源化恒定區(qū)(hFc),可以被 SA-HRP、SA-RPE 識別,利于更高效的使用化學發(fā)光或者熒光方法進行檢測。
1.4 試劑盒組分
抗體與對應的標簽之間有特異性的結合,將抗體偶聯在 Beads 上,就可以把帶有對應標簽的融合蛋白結合到 Beads 上。經過緩沖液去除雜蛋白等步驟之后,融合蛋白可以使用變性劑或者高溫處理等方式從 Beads 上洗脫下來。為方便使用,本試劑盒提供多種試劑方便客戶更好的進行蛋白互作實驗,具體的組份見表 1。
試劑盒成份 | 規(guī)格/10T | 規(guī)格/50T |
Magneti-G Anti-DYKDDDDK Beads | 0.2ml | 1ml |
Magneti-G Control IgG Beads | 0.1ml | 0.5ml |
IP Lysis Buffer A(5×) | 4ml | 20ml |
IP Lysis Buffer B | 0.2ml | 1ml |
IP Wash Buffer(10×) | 8ml | 40ml |
Elution Buffer D | 0.8ml | 4ml |
2×SDS Loading Buffer | 0.4ml | 2ml |
RFP 蛋白 | 0.1mg | 0.5mg |
說明書1份 |
名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Magneti-G DYKDDDDK標簽免疫沉淀/共沉淀試劑盒 | BK0048-01 | 10T |
BK0048-02 | 50T |