免疫沉淀 (Immunoprecipitation，IP) 是利用抗原抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白常用的一種實驗方法?？贵w與目的蛋白結(jié)合后，再與ProteinA/G偶聯(lián)的Agarose或Sepharose珠子孵育，進而分離得到珠子-ProteinA/G-抗體-目的蛋白復(fù)合物，隨后可通過WB實驗檢測目的蛋白及與目的蛋白相互作用的其他蛋白或蛋白復(fù)合體。

然而在免疫沉淀和免疫共沉淀(co-IP) 實驗中，常常因為一抗的限制，IP和WB的操作過程中不得不用到同種一抗或同種屬來源的一抗。這種情況下，如果使用常規(guī)的抗種屬IgG酶標二抗，WB實驗中將檢測到IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈（約55kDa）和輕鏈（約25kDa）。由于IP時使用的抗體量往往比WB檢測時抗體使用量大非常多，此時非特異的信號往往會部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信號，尤其是輕重鏈附近的條帶，極大地影響實驗結(jié)果的準確性。
如何避免IP檢測過程中輕、重鏈的干擾，以下經(jīng)驗可供大家參考：
方案一 WB檢測時選擇和IP時不同種屬的一抗，避免IP一抗的影響

通過使用不同種屬來源抗體，WB 檢測時可以有效避免重鏈輕鏈信號的影響。但如果市面上一抗沒有多種種屬來源可供選擇，將極大的限制實驗開展；同時，同類抗體需要不同種屬來源大大增加項目支出成本。
方案二 Wb檢測時選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗
為了避免輕、重鏈的影響，WB檢測時可根據(jù)目標蛋白分子量選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗。如果目標蛋白分子量靠近25KD，為了避免抗體輕鏈的干擾，選擇重鏈特異性二抗；如果目標蛋白分子量靠近55KD，為了避免抗體重鏈的干擾，選擇輕鏈特異性二抗。
雖然上述兩種方案可以規(guī)避輕、重鏈的影響，但是在實際操作過程中仍顯得復(fù)雜和繁瑣。現(xiàn)提供一種簡單有效的方案——IP專用納米二抗，讓輕、重鏈的影響不再成為IP實驗的障礙。
Anti-Mouse/Rabbit lgG for IP AlpSdAbs® VHH(HRP)是基于單價重組納米抗體與HRP定點偶聯(lián)而成，可有效的檢測IP實驗中鼠源或兔源的一抗，并且不用擔(dān)心IP抗體輕、重鏈的影響。
IP專用納米二抗選擇性地檢測lgG的非還原形式(構(gòu)象特異性)，與還原的變性形式無反應(yīng)。在IP實驗中，當(dāng)一種蛋白被IP抗體免疫沉淀后，仍然可以用同一種一抗或同種屬來源的一抗檢測目的蛋白，而不用擔(dān)心輕重鏈的干擾。用IP專用納米二抗來檢測一級抗體，只能識別天然構(gòu)象的一抗，不能識別變性后的IP抗體重鏈和輕鏈，有效的避免了輕重鏈的干擾，讓IP實驗檢測更準確。同時，IP專用納米二抗保留了納米抗體高親和力、高結(jié)合力、極端穩(wěn)定的特性，能高效快速穩(wěn)定的結(jié)合目的蛋白;IP專用納米二抗采用重組表達，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，極大的降低了批間差異，讓實驗更穩(wěn)定、更簡單，讓您的IP實驗更加放心舒心。


IP專用納米二抗產(chǎn)品：

貨號	名稱	規(guī)格	價格
001-100-005	Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1600
001-180-005	Anti-Mouse&Rabbit Light chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1500
001-190-005	Anti-Mouse&Rabbit Heavy chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1500