IP專用納米二抗---高效消除輕重鏈干擾

Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)是新一代IP專用納米二抗。IP專用納米二抗只識別構(gòu)象型IgG, 從而避開傳統(tǒng)方法中抗體輕、重鏈的干擾。

免疫沉淀 (Immunoprecipitation，IP) 是利用抗原抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白常用的一種實(shí)驗(yàn)方法?？贵w與目的蛋白結(jié)合后，再與ProteinA/G偶聯(lián)的Agarose或Sepharose珠子孵育，進(jìn)而分離得到珠子-ProteinA/G-抗體-目的蛋白復(fù)合物，隨后可通過WB實(shí)驗(yàn)檢測目的蛋白及與目的蛋白相互作用的其他蛋白或蛋白復(fù)合體。

 

然而在免疫沉淀和免疫共沉淀(co-IP) 實(shí)驗(yàn)中，常常因?yàn)橐豢沟南拗?，IP和WB的操作過程中不得不用到同種一抗或同種屬來源的一抗。這種情況下，如果使用常規(guī)的抗種屬IgG酶標(biāo)二抗，WB實(shí)驗(yàn)中將檢測到IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈（約55kDa）和輕鏈（約25kDa）。由于IP時(shí)使用的抗體量往往比WB檢測時(shí)抗體使用量大非常多，此時(shí)非特異的信號往往會部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信號，尤其是輕重鏈附近的條帶，極大地影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

如何避免IP檢測過程中輕、重鏈的干擾，研究人員們經(jīng)過長時(shí)間的摸索，總結(jié)了如下三條經(jīng)驗(yàn)可供大家參考：

 

 

01方案一

WB檢測時(shí)選擇和IP時(shí)不同種屬的一抗，避免IP一抗的影響。

通過使用不同種屬來源抗體，WB 檢測時(shí)可以有效避免重鏈輕鏈信號的影響。但如果市面上一抗沒有多種種屬來源可供選擇，將極大的限制實(shí)驗(yàn)開展；同時(shí)，同類抗體需要不同種屬來源大大增加項(xiàng)目支出成本。

方案二  Wb檢測時(shí)選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗。

為了避免輕、重鏈的影響，WB檢測時(shí)可根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗。如果目標(biāo)蛋白分子量靠近25KD，為了避免抗體輕鏈的干擾，選擇重鏈特異性二抗；如果目標(biāo)蛋白分子量靠近55KD，為了避免抗體重鏈的干擾，選擇輕鏈特異性二抗。

 

為避免在實(shí)際操作過程中選擇對應(yīng)抗體的復(fù)雜和繁瑣，現(xiàn)提供一種更簡單有效的方案，推出特異識別鼠、兔輕鏈或者重鏈的IP后專用二抗，讓輕、重鏈的影響不再成為IP實(shí)驗(yàn)的障礙。
提供以下IP專用納米二抗產(chǎn)品：

Code Number	Product Description	Size	prices(¥)
001-180-005	Anti-Mouse&Rabbit Light chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100μL	¥1,500.00
001-190-005	Anti-Mouse&Rabbit Heavy chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100μL	¥1,500.00

方案三  識別構(gòu)象型二抗
Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs^®VHH(HRP) -IP專用納米二抗是AlpVHHs推出的新一代IP專用納米二抗。IP專用納米二抗來檢測一級抗體，只能識別天然構(gòu)象的一抗，不能識別變性后的IP抗體重鏈和輕鏈，有效的避免了輕重鏈的干擾，讓IP實(shí)驗(yàn)檢測更準(zhǔn)確。同時(shí)，IP專用納米二抗保留了納米抗體高親和力、高結(jié)合力、極端穩(wěn)定的特性，能高效快速穩(wěn)定的結(jié)合目的蛋白；IP專用納米二抗采用重組表達(dá)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，極大的降低了批間差異，讓實(shí)驗(yàn)更穩(wěn)定、更簡單，讓您的IP實(shí)驗(yàn)更加放心舒心。

提供以下IP專用納米二抗產(chǎn)品：

Code Number	Product Description	Size	prices(¥)
001-100-005	Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs®VHH(HRP)	100μL	¥1,600.00