His tag融合蛋白是目前最常見(jiàn)的表達(dá)方式,his tag的優(yōu)勢(shì):
? 標(biāo)簽小,分子量不到0.84kD,填料價(jià)格便宜;
? 純化步驟簡(jiǎn)便,純化條件溫和;
? 能純化可溶性/包涵體蛋白,一般不會(huì)影響蛋白的功能結(jié)構(gòu)。
在檢測(cè)His tag融合蛋白過(guò)程中,一個(gè)特異性好、靈敏度高的His tag 抗體是不可或缺的。為了突破常規(guī)的his tag 抗體只能識(shí)別C端 or N端His tag,親和力不高 ,類別不全等不足,臨界點(diǎn)基于可分泌yeast surface display 平臺(tái),篩選出同時(shí)識(shí)別N端與C端his tag的高親和力抗體。通過(guò)與常見(jiàn)的物種的Fc 融合(Rabbit,Mouse,Human與Llama )后CHO細(xì)胞重組表達(dá)而成的Anti-His tag是檢測(cè)His tag融合蛋白的絕佳工具。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1親和力高,特異強(qiáng);
2不僅能識(shí)別6xHis-tag,而且能識(shí)別5xHis-tag和4xHis-tag;
3能夠識(shí)別融合蛋白N末端、C末端及氨基酸序列中間的His-tag標(biāo)簽;
4CHO穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系表達(dá),批間差異小。
驗(yàn)證數(shù)據(jù)
親和力檢測(cè)
ELISA
Anti-His tag,AlpHcAbs® Rabbit antibody(HRP)(004-202-005)能高效識(shí)別N端及C端的His tag。
免疫熒光
WB
流式
流式檢測(cè)His tag融合蛋白在細(xì)胞表面表達(dá)情況:Blue(Anti-His tag, AlpHcAbs® Rabbit antibody(iFuor647) vs Red(同型對(duì)照)。