血清保存與解凍

保存血清最好的方法？
 
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃至–70℃低溫冰箱中。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10％，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?br />如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您采用逐步解凍法：將-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清取出后先置于2℃-8℃冰箱中使之融解，然后移入室溫待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需輕輕規(guī)則地?fù)u晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會(huì)增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
盡量避免沉淀物的產(chǎn)生的方法：
①解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。 
②解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。 
③請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。 
④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。 
⑤若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
 
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
 
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
血清是否一定要滅活？
經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。
經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤認(rèn)為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此建議若非必須，可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節(jié)省寶貴的時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量！