在WesternBlotting實驗中,我們應該怎樣盡量減少有毒物質(zhì)對身體的傷害?
發(fā)布時間:2020-12-08 05:18:22 點擊:
生物學實驗室中研究對象主要是細胞,DNA,RNA和蛋白質(zhì)。實驗過程中我們常常要對這些實驗對象進行觀察,提取,裂解等操作。然而,要知道我們?nèi)梭w本身就是由細胞組成的,細胞內(nèi)包括DNA,RNA,蛋白質(zhì)。所以對這些實驗對象進行操作時,使用的很多試劑也會對我們身體產(chǎn)生危害。今天,小編就為大家介紹一下WB實驗中常見的幾種有毒物質(zhì)以及防護措施。
丙烯酰胺Acrylamide聚丙烯酰胺是SDS-PAGE凝膠中的主要成分。未聚合的丙烯酰胺是一種潛在的神經(jīng)毒素,可通過皮膚吸收。丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,同時還有生殖、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學習、記憶和其他認知功能部位的退行性變化,試驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,職業(yè)接觸人群的流行病學觀察表明,長期低劑量接觸丙烯酰胺會出現(xiàn)嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺和震顫等癥狀,伴隨末梢神經(jīng)病如手套樣感覺、出汗和肌肉無力。具有累積毒性,不容易排毒。因此在稱量丙烯酰胺和亞甲基雙酰胺粉末時,戴好手套和面罩,在化學通風櫥內(nèi)操作。聚合的丙烯酰胺是無毒的,但是使用時也應小心,因為其中可能喊有少量未聚合的丙烯酰胺。
N,N’-亞甲雙丙烯酰胺有毒,影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),切勿吸入。
過硫酸銨(APS)對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性,吸入可致命。操作時戴合適的手套、安全眼鏡和防護服。始終在通風櫥里操作,操作完后徹底洗手。
TEMEDTEMED是四甲基乙二胺(Tetramethylethylenediamine)的縮寫。TEMED常用于SDS-PAGE中凝膠的制備。與過硫酸銨連用催化丙烯酰胺的聚合,制取在凝膠電泳用于分離蛋白質(zhì)或核酸的聚丙烯酰胺凝膠。TEMED易燃,有腐蝕性,具有強神經(jīng)毒性。另外,TEMED易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套,戴口罩操作。
b-巰基乙醇 b-巰基乙醇是一種強還原劑,它被廣泛使用的原因是它的羥基使它能夠溶解于水中,并且降低它的揮發(fā)性。常用于蛋白質(zhì)電泳的loading buffer內(nèi),主要作用是破壞二硫鍵。β-巰基乙醇有難聞氣味。高濃度溶液對黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害。操作時需要戴好手套和護目鏡并在通風櫥內(nèi)操作。
二硫蘇糖醇DTT二硫蘇糖醇(DTT),同巰基乙醇一樣是很強的還原劑,散發(fā)難聞的氣味。可用作蛋白質(zhì)的保護劑,用于防止蛋白質(zhì)內(nèi)的半胱氨酸被氧化。也可用于SDS-PAGE電泳時樣品的添加劑,用于徹底打破蛋白質(zhì)中的二硫鍵??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時,戴手套和護目鏡,在通風櫥中操作。
苯甲基磺酰氟PMSF這里必須要給一個大大的危險符號,PMSF劇毒,請一定小心使用?。?!
苯甲基磺酰氟(PMSF),常用于蛋白質(zhì)的提取過程中,是胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的抑制劑,可抑制絲氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶,是一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學通風櫥里使用。在接觸到的情況下,要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服丟棄掉。
甲醇甲醇常常用于分析試劑或者清除去油劑,有很大的毒性并易揮發(fā)。甲醇的毒性對人體的神經(jīng)系統(tǒng)和血液系統(tǒng)影響最大,它經(jīng)消化道、呼吸道或皮膚攝入都會產(chǎn)生毒性反應,甲醇蒸氣能損害人的呼吸道粘膜和視力。急性中毒癥狀有:頭疼、惡心、胃痛、疲倦、視力模糊以至失明,繼而呼吸困難,最終導致呼吸中樞麻痹而死亡。慢性中毒反應為:眩暈、昏睡、頭痛、耳鳴、視力減退、消化障礙。使用時要避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和安全眼鏡。
紫外光紫外光是實驗室中常見的光源。能夠用在無菌室進行滅菌,也會用來觀察凝膠中的DNA。紫外光可損傷眼視網(wǎng)膜。切勿用裸眼和沒有防護裝置的紫外光源。在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀。只能通過吸收有害波長的濾片或安全玻璃片才能觀察。紫外線也是誘變劑和致癌的。為使暴露減少到最低限度,確保紫外光源要采用適當防護裝置。在紫外光下操作時要戴合適的預防性手套。
疊氮鈉(NaN3) 在生化研究中,疊氮化鈉屬于誘變劑,與其化學性質(zhì)有關的解釋是因為疊氮酸根離子可以與某些酶作用,主要是因為它有一定的配位性,可以替代某些正常的配體,而使某些生物蛋白質(zhì)發(fā)生突變。 毒性非常大。它阻斷細胞色素電子運送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標記清楚??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護目鏡,操作時要格外小心。